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FUT8 细胞系分享猪α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒

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heshaoyu55 发表于 2024-4-18 07:09 | 显示全部楼层 |阅读模式


  FUT8 细胞系需自备的设备及试剂:
  1.450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)
  2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
  3.Eppendorf移液器.
  4.蒸馏水或去离子水.
  5.脱脂棉吸水纸.
  6.37℃恒温箱.
  7.100ml和1000ml量筒.
  8.准备若干个标准品稀释管.
  试剂盒的储存及有效期:
  未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
  使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
  实验原理:
  将目标抗体包被于微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
  精密度:
  精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100
  批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
  批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
  批内差:CV<10%Inter-批间差:CV<13%
  稳定性:
  经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
  为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
  友情提醒:
  试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染!


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