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1. 用盖片镊人Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出,游离抗体药含量用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布。
2. 将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片)。
3. 在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时。
4. 将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中。
5. 将人Elisa试剂盒培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
人Elisa试剂盒注意事项:
1. 人Elisa试剂盒解冻与存放:-20℃取出后建议放入2——8℃冰箱中解冻约,每隔一段时间轻轻摇晃均匀,不可直接放入温度较高处解冻,避免因温度改变太大,造成蛋白质凝集而出现沉淀,血清的质量下降。若短期无法用完一瓶,建议无菌分装,再放回冷冻,避免反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白,形成絮状物质变差。
2. 人Elisa试剂盒是否灭活:加热可灭活血清中补体系统,在极少数情况下(培养ES细胞,平滑肌细胞时)建议灭活,在培养其余细胞时不建议灭活血清。血清灭活非常容易产生沉淀,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃原则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。
3. 人Elisa试剂盒培养基:无血清培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,但是,血清仍然是培养液中基本的添加物,尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛后再换成无血清培养液。
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